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济南组培设备一植物组培室基本设备及培养

作者:组培仪器设备_组培瓶编辑 发布时间:2018-11-07 16:59 浏览次数:

文章来源:www.hxcszlk.com/news/gsxw/130.html

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济南组培设备一植物组培室基本设备及培养基配置:

一、组培设备实验目的:了解植物组织培养实验室的基本组培设备及其用途、并掌握使用方法;学习培养基的配制方法。

二、组培设备实验过程:

1、组培室基本设备:

1)、超净工作台:由鼓风机、中效及高效过滤板、紫外灯、照明灯、工作台面、控制面板组成。

2)、高压灭菌锅:由内锅、外锅、进水口、出水口、安全阀、排气管、压力表、电热管等组成。

3)、其它设备:天平、冰箱、培养架、接种器具、培养瓶及其它一般实验室常用仪器、玻璃器皿等。

2、培养基配制:(以配制1升MS培养基为例)

1)、母液配制;

2)、1升MS培养基配制:

①培养基配制:取大量元素50ml;微量元素、铁盐、维生素、肌醇各10ml;琼脂4.5g;糖30g、激素用量按培养要求加入,定容1000ml,加热至800C左右至琼脂溶解。

②调整pH:用0.5.0NNaOH或0.5NHCl调整pH,一般要求pH5.8—6.0。

组培设备

③分装:趁热把培养基分装入培养瓶,旋紧瓶盖,置于高压锅内。

④灭菌:接通高压灭菌锅电源,加热至压力为0.1MPa,停电,排气至压力为0,再加热至压力为0.1Mpa,保温20分钟,停电,排气至压力为0,取出培养基,置于干净的场所。灭菌过的固体培养基在温度600C左右时不能摇动,否则会影响凝固效果。3实验二植物茎段培养一、试验目的:以植物茎段为外植体,诱导茎段侧芽萌发形成单芽。二、实验材料:木薯带腋芽的茎段。三、实验设备:超净工作台,各种接种用具等。4

三、组培设备实验方法:

1、取1—3月龄木薯幼茎,切成带一个节的约1.5cm长的茎段,用自来水冲洗5分钟,

2、接种前,打开超净工作台紫外灯20—30分钟,关紫外灯,打开风机20分钟,用75%酒精擦超净台台面。接种人员洗净双手,用75%酒精擦双手,然后可以开始接种。

3、在超净工作台内,用0.1%升汞溶液浸泡木薯茎段8—9分钟,无菌水冲洗3—5次。接种于MS+6-BA3mg/L的培养基中。

4、3天后可观察是否污染,7天左右可观察到腋芽是否萌发。

5、待侧芽长出4—5节时,可将腋芽剪成带1—2个腋芽的节段,继代进行增殖培养。

5实验三百合鳞片培养一、实验目的:通过百合鳞片培养,诱导不定芽形成。

二、组培设备实验材料:

百合鳞茎三、实验设备:超净工作台,各种接种用具等。

四、实验方法:

1、把百合鳞茎剥开,洗去上面泥土,用洗衣粉溶液浸泡10min,自来水冲洗5min,再用高锰酸钾溶液浸泡10min,自来水冲洗10min。

2、接种前,打开超净工作台紫外灯20—30分钟,关紫外灯,打开风机20分钟,用75%酒精擦超净台台面。接种人员洗净双手,用75%酒精擦双手,然后可以开始接种。

3、在超净工作台内用75%酒精表面灭菌30s,无菌水冲洗一次,0.1%HgCl溶液中灭菌12min,再用无菌水冲洗5-6次,接种于MS+6-BA33mg/L的培养基中。4、约1~2周后可观察到不定芽形成。  

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